冷胁迫是应响农农物产能的最主要环镜试练之五。钙依懒性核蛋白激酶（CDPKs/CPKs）可将钙（Ca²⁺）表现传承到细胞系并提高对面对困境加载的根本调整分子，但其调整机能尚不明确。

2025年4月，浙江大学周艳虹教授团队在New Phytologist杂志上发表题为“CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato”的研究论文，揭示了CPK27通过磷酸化HY5促进类黄酮生物合成，从而将冷触发的Ca²⁺信号与类黄酮途径相结合，以增强番茄冷耐受性的分子机制。本文为理解冷信号转导提供了重要策略，拜谱生物为该研究提供了磷硝化作用淡化位点监测服务。

日文标题格式：CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato（New Phytologist IF：8.3）

中文翻译副标题：CPK27通过磷酸化HY5促进黄酮类化合物的生物合成来增强番茄的耐寒性

玩家企业：浙江大学

钻研用料：番茄

拜谱供应技巧：磷酸性反应修饰语位点的检测

探究要点：

一、研究分析結果

1、CPK27在高温胁迫下表达出调涨，故而提升根系耐低温性

已往探析认为，CPK27在冷胁迫能力下传达上浮。为认证某些最后，这篇文章中我使用的CPK27的多个敲除突变率系（cpk27 #2，#6）做出耐旱性性测量，出现CPK27的转录技术重要要高于對照组（图1a-b）。在CPK27传达被缓和的苔藓植物中，对耐旱性性的激发功用重要降低。进一部的亚人体人体细胞市场定位与重置探析认为，冷胁迫推动CPK27向人体人体细胞积攒，并激发其磷过酸技术（图1 f）。免疫力痕迹阐述进一部验证冷胁迫引导 CPK27 在核内核蛋白丰度提高、胞内丰度提高，外源CaCl₂解决可区域找回cpk27的冷脆弱表型，认为CPK27依赖症Ca²⁺无线信号起着功用。（图1g-k）

图1 CPK27以Ca²⁺信任方试怎强番茄耐热性

2、CPK27经过改善黄胺类人工路线缓减较低温度挫伤

转录组测序结杲提升，CPK27的过抒发爱明显调整黄胺类怪物制作而成涉及到的DNA，如CHS、CHI和FLS等，同时黄胺类分泌环路明显聚集。而CPK27突然变化体中这DNA抒发爱调低，提升CPK27可以通过推动黄胺类制作而成可以帮助植物体缓解放松低溫胁迫引发的被氧化水压（图2a-e）。

图2 RNA-seq解析CPK27国家宏观调控的冷运行染色体

3、HY5是CPK27介导的抗寒表现通道中的重要的靶标

为查证 CPK27 与 HY5 的互不功用，著者关键在于进行了发酵粉双杂交种（Y2H）科学测试报告，后果灵魂出现双方出现互不功用（图3a）。双原子荧光互替（BiFC）科学测试报告进几步证明CPK27 与 HY5 在受损细胞结构内发生了互不功用（图 3b）。之后完成免役共发展等技术设备，看见HY5与CPK27在植被机体出现互不功用，且双方的互不功用兼具钙阴离子（Ca²⁺）依懒性（图 3c）。不仅而且，在Co-IP科学测试报告的核蛋白提现前产生冷胁迫处里，后果彰显冷胁迫可增強HY5与CPK27的互不功用（图 3d）。

图3 CPK27与HY5互作并磷碱化其核心位点

4、CPK27磷过酸HY5激发其转录活性酶类，带动黄胺类人类基因表示

免疫印迹分析结果发现，冷胁迫处理后CPK27可提高HY5蛋白的磷酸化水平，在体外直接磷酸化 HY5（图 4a-c）。通过磷酸性反应突显位点探测，发现HY5蛋白的S23和S57两个潜在磷酸化位点。为验证这些位点的功能，作者通过构建非磷酸化突变体，进行磷酸化水平验证，其中双突变体的磷酸化水平下降更为明显（图 4d）。这些结果表明，CPK27 介导的 HY5 磷酸化依赖于 S23 和 S57 这两个特定位点。

图4 CPK27磷酸性反应HY5并增强学习其增强性

5、CPK27 在类黄酮菌物人工通道中帮助于HY5的长江上游

基础性基因组表达方法和分解代谢物研究报告单（图5），CPK27在冷胁迫异常的时候中帮助于HY5的上下游，依据监测 HY5 介导的类黄酮生物制品合并信号通路危害沉水植物抗寒性。

图5 CPK27能力于HY5上下游

二、内容个人总结

上述讲到相一致，中心句深入分析分析意味着CPK27磷酸性反应绘制HY5淀粉酶，激发类黄酮镶嵌行业，促成人体抗氧化性物物料沉积，而使不断增强耐冷程度。该深入分析分析相一致了“Ca²⁺-CPK27-HY5-类黄酮”级联干预策略（图6），得知CPK27介导的HY5磷酸性反应是相连接钙数据信号与次生基础代谢防御性的重要阶段，为认知绿植挫折出错数据网络供给了新视域。

图6 CPK27-HY5控制模块增加绿植受冷胁迫的考核机制

三、拜谱总结ppt

本研究利用转录组和磷酸化修饰位点检测等技术，揭示了CPK27通过磷酸化 HY5调控类黄酮生物合成途径，从而在寒冷环境下增强番茄耐寒性的机制，对解析植物应对寒冷的复杂分子调控网络具有重要意义。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的核苷酸质组学、修饰语核苷酸质组学、基础代谢组学、转录组学等多个学新产品技术服务，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。欢迎咨询！

参考使用论文资料：Lin R, Zhang W, Tian R, et al. CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato. New Phytol. 2025;246(5):2174-2191. doi:10.1111/nph.70134