肉的宰后嫩化最主要归因于肌原仟维成分的毁掉，肌原仟维成分是由内源性淀粉酶溶解酶吸附肌原仟维和神经元核系骨架淀粉酶带来的。与一百多年来一直都是关注度对象的钙淀粉酶酶的不同，胱天淀粉酶酶（caspases）在最近这一段时间拥有感爱好一段话题。胱天淀粉酶酶在神经元核系凋亡的实行时候起着至关必要的意义，表中caspase-3在去世后淀粉酶溶解中的意义是几各方面和比较复杂的，由于指的进一点论述。S-亚硝基化确认调接钙降低、能量转换新陈代谢、淀粉酶质吸附和神经元核系凋亡来调接色泽，包涵嫩度和持水程度。先期论述显示S-亚硝基化能能调低依赖性线粒体的caspase-3级联反响，这会是肌肉组织神经元核系凋亡和牛羊肉品质质量转变的原由。caspase-3的论述突出是其与神经元核系凋亡的感情，而是，少许有论述试论S-亚硝基化调接caspase-3的措施。

2024年9月由苏州草业高校张万刚讲解微商团队在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱生物体为该研究提供了亚硝基化遮盖组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

中文字幕网站标题：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

刊物：Journal of Agricultural and Food Chemistry

2028年影晌细胞：5.7

收录耗时：2024年9月

买家单位名称：南京农业大学

研究探讨素材：蛋白

拜谱具备高技术：亚硝基化修饰组学

技术应用路经：

一、论述没想到

01.Caspase-3可溶性

近些年尚不了解清楚NO对caspase-3的减弱的作用是否有归因于NO介导的S-亚硝基化，有所不同氨水浓度均值的GSNO做为外源性NO销售，以诱导型caspase-3的离体S-亚硝基化。成果是因为，与不存在GSNO的组相信，100、200和400μM GSNO组的caspase-3化学活化取得降底（图1），与仍然新闻稿不一。GSNO除理降底caspase-3化学活化的自身问题仍亟待揭示。

图1 各种不同浓度值的GSNO工作对caspase-3生物的损害

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化的程度

探析Caspase-3的亚硝基化度，以相一样GSNO对Caspase-3的发应性。经GSNO操作后，查测到caspase-3淀粉酶S-亚硝基化层度加剧（图2）。这一些結果体现了，外源性GSNO培养教育可实现目标诱导型caspase-3的身体之外S-亚硝基化。最令 惊叹的是，在没得GSNO存有的差表组中查测到某个忽闪的S-亚硝基化带，这体现了caspase-3会突发内源性的S-亚硝基化。虽然，本探析中caspase-3的S-亚硝基化度较高，而caspase-3的抗逆性拉低，这与此前的探析一样。而是，caspase-3的特情人S-亚硝基化突显位点尚不看清楚，还所需进步的探讨。

图2 GSNO工作对caspase-3S-亚硝基化水平面的反应

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化修饰语组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的字段。绿色标识的字段写出S-亚硝基化肽，红颜色标识的C写出S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱仪

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3光降解结淀粉酶

结血清质充当属于为必要的血组织骨架血清质，在维护肌血组织成分的成分完好性性和抽缩性管理方面起着为必要的作用，的研究S-亚硝基化caspase-3对结血清质化学吸附的敏感度性更具为必要必要性。与Std（未用胱天血清质酶-3和GSNO孵育的初始值肌玻璃食物纤维血清质）组相比较，0 μM GSNO组（肌原玻璃食物纤维和caspase-3的孵育，无GSNO）的完好性结血清质占比取得消减，提示信息caspase-3对结血清质更具存在的血清质油脂水解业务能力。在GSNO孵育后，完好性结血清质的占比明星提升（P < 0.05）。另外，当GSNO有机废气浓度偏高时，完好性结血清质的占比继续上浮（P < 0.05）（图5）。这发觉说明，SNO遮盖的caspase-3以水平方向依赖症的习惯阻止结血清质的化学吸附。

图5.S-亚硝基化caspase-3光降解结蛋清

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3溶解肌钙淀粉酶-T

肌钙蛋清质-T (TnT)是原肌球蛋清质调低担负身体肌肉收拢的丝条的必要肌原植物玻纤素蛋清质。TnT的生物可吸附特点是查测到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化因素下，caspase-3对TnT的生物可吸附前提如图是6如图，与Std组（包括caspase-3和GSNO的肌原植物玻纤素）比较，caspase-3组中30 kDa TnT精彩场面描写为有明显添加，取决于caspase-3参与进来了TnT的生物可吸附，另外，caspase-3与GSNO的孵育造成30 kDa TnT遏制。在100和200 μM GSNO组内并没有查测到很明显的文化差异(P > 0.05)，而当GSNO的浓硫酸浓度实现400 μM 时，该精彩场面描写为有明显遏制(P < 0.05)。许多说明取决于了SNO体现的caspase-3对TnT生物可吸附的遏自制用。结蛋清质和TnT是caspase-3的皮肤敏感底物，而GSNO治理拉低caspase-3的几丁质酶可能会造成肌原植物玻纤素蛋清质生物可吸附数量拉低。上述讲到根据上述，NO引导的S-亚硝基化可顺利通过体现半胱氨酸残基来调低caspase-3的几丁质酶，因此进三步应响其对结蛋清质和TnT的蛋清质水解反应实力，故而应响牛羊肉高质量。

图6. S-亚硝基化caspase- 3生物降解肌钙蛋白酶-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、个人总结

本科研为了更好地一起探讨S-亚硝基化对caspase-3遮盖的的决定举例自后对牛肉片片肌原黏胶钎维身体外降解塑料的的决定。球球核蛋白S-亚硝基化需要遮盖caspase-3的半胱氨酸残基，以此出现caspase-3灵活性大大减少，进一次控制了其对牛肉片片肌原黏胶钎维球球核蛋白的球球核蛋白油脂水解特性。

三、拜谱总结ppt

设计主要采用了酶活测定法，亚硝基化表达组学分析一下，WB等加测伎俩，遇到球淀粉酶S-亚硝基化应该表达caspase-3的半胱氨酸残基，这影响了caspase-3灵活性的降低，相结几步抑止了其对羊肉肌原食物纤维球淀粉酶的球淀粉酶淀粉水解实力。本设计为诠释球淀粉酶质亚硝基化对肉质地的调节作用体系展示 好几回个新的画面。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的氨基酸质组学、突显氨基酸质组学、产生组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸型号企业产品，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺酸性反应、total硫化还原成、氧化钙含量巯基，欢迎大家咨询！

考虑文章：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663